Explicat: De ce mai multe persoane cu simptome de Covid sunt negative la teste?
Multe persoane cu simptome de Covid-19 au fost negative la teste. Există mai multe motive probabile, cum ar fi mutațiile virusului care scapă de detectare, calitatea eșantionării și a testării și eficacitatea truselor RT-PCR.
Testele pot merge prost în diferite etape, de la colectarea și depozitarea proastă a probelor până la extracția și amplificarea defectuoasă. (Fotografie expresă: Vishal Srivastav) Pe măsură ce India se luptă să facă față cererii fără precedent de teste RT-PCR, rapoartele sugerează că până la 20% dintre pacienții simptomatici cu Covid-19 sunt teste negative.
Această tendință aparentă de rezultate fals negative poate împiedica pacienții serioși internarea la spital și îngrijirea critică, în timp ce îi permite pe cei asimptomatici să se miște și să răspândească virusul. Tendința a determinat experții, inclusiv directorul AIIMS, Dr. Randeep Guleria, să recomande tratamentul Covid-19 tuturor celor care prezintă simptome clasice, indiferent de rezultatele RT-PCR.
Buletin informativ| Faceți clic pentru a primi cele mai bune explicații ale zilei în căsuța dvs. de e-mail
De ce fals negative
Testele RT-PCR, considerate standardul de aur în diagnosticarea Covid-19, nu sunt menite să fie perfecte. Sensibilitatea minimă (capacitatea de a detecta pozitive) cerută de Consiliul Indian de Cercetare Medicală (ICMR) pentru validarea unui test RT-PCR este de 95%. Aceasta înseamnă că sunt așteptate până la 5% rezultate fals negative.
În timp ce rapoartele anecdotice sugerează că ponderea rezultatelor fals negative este în creștere în India, nu există încă niciun studiu care să susțină acest lucru.
În teorie, patru factori largi determină acuratețea unui test RT-PCR: încărcătura virală la persoană, calitatea colectării și prelucrării probelor, eficacitatea trusei de testare în sine și, de asemenea, punctul de referință pentru interpretarea testului.
ÎNCĂRCĂTURA VIRALĂ: De obicei, Covid-19 se manifestă în mod adecvat în a cincea zi a unui ciclu de infecție. Testată mai devreme după expunere, o persoană infectată se poate dovedi negativă pentru Covid. Acesta poate să nu fie un factor major din spatele tendinței fals negative recente, deoarece anumiți mutanți de Covid-19 arată aparent simptome timpurii.
Un număr de pacienți simptomatici care au testat fals negativ în testele RT-PCR au fost ulterior confirmați pozitiv pentru Covid în testele de spălare bronhoalveolar (BAL) care colectează probe din tractul respirator inferior printr-un bronhoscop. Acest lucru a condus la presupuneri că anumiți mutanți ocolesc tractul respirator superior pentru a ținti plămânul - un scenariu care poate infirma un test RT-PCR, pe baza unei probe colectate din cavitatea nazală și gât, încărcătura virală necesară pentru un rezultat precis.
colin cowherd net value
EXPLOZIE DE CAPACITATE: Numărul de laboratoare de testare Covid din India a crescut de la 14 în februarie 2020 la peste 2.400 în aprilie 2021. O astfel de expansiune rapidă a necesitat aprobarea a sute de laboratoare pentru testarea RT-PCR și formarea în grabă a mii de tehnicieni.
Ca măsură de siguranță, ICMR a enumerat în iulie 2020 30 de laboratoare de control al calității pentru a verifica toate laboratoarele Covid pe care le-a aprobat. De atunci au fost adăugate alte 8 laboratoare QC. Cu toate acestea, surse din mai multe laboratoare din trei state au spus că au avut loc doar câteva inspecții ale instalațiilor și instrumentelor.
În mod ideal, un amestec de probe pozitive și negative ar trebui prelevate la întâmplare din fiecare laborator periodic pentru re-testare. S-a făcut asta vreodată? Da. S-a făcut asta în mod constant? Nu, a spus un om de știință de la un institut ICMR care nu este autorizat să vorbească cu presa.
Abordate pentru monitorizarea periodică a laboratoarelor și datele privind conformitatea calității din iulie 2020, ICMR și o serie de laboratoare QC au rămas tăcute.
ELEMENT UMAN: Testele pot merge prost în diferite etape - de la colectarea și depozitarea proaste a probei până la extracția și amplificarea defectuoasă. Toate kiturile RT-PCR includ un control intern (IC) pentru a proteja împotriva unui scenariu în care nu este extras/amplificat ARN, ceea ce duce la un fals negativ. IC poate fi exogen sau endogen. Este exogen atunci când o moleculă șablon de ARN artificială este adăugată la fiecare probă înainte de extracția ARN. Testul este considerat nul atunci când ARN-ul sintetic nu este detectat după extracție și este prescris un re-test. Și, un control endogen folosește o genă umană „de întreținere” prezentă în probă; nedetectarea acestuia după procedura de extracție a ARN invalidează testul.
O genă umană de întreținere asigură, de asemenea, calitatea probei... Dar peste 75% kituri RT-PCR de pe piața indiană folosesc controale interne exogene mai ieftine, a spus un biolog molecular din Mumbai.
POS din aprilie 2020 al ICMR privind RT-PCR a susținut că controlul exogen pentru extracție poate fi ignorat, deoarece nu va reflecta calitatea probei colectate. S-a recomandat ca RNaza P separată sau orice altă genă umană de întreținere... să fie puse în paralel într-un tub separat... (pentru a) verifica atât calitatea probei colectate, cât și procedura de extracție.
În mai 2020, mega-licitația lansată de ICMR/HLL pentru kiturile RT-PCR a specificat cerințe similare. O serie de producători au susținut că diferite companii utilizează controale interne diferite, inclusiv cele exogene, care au fost aprobate de agențiile de reglementare, cum ar fi FDA și CEIVD, și că selecția adversă bazată pe gene de întreținere ar descuraja concurența loială. În cele din urmă, licitația a fost revizuită pentru a include atât opțiuni endogene, cât și exogene pentru controlul intern.
MUTATIE VIRALA: Un test RTR-PCR vizează zone specifice ale uneia sau mai multor gene virale pentru a detecta prezența acestuia. Un test poate returna rezultate fals negative dacă apare o mutație în segmentul genomului evaluat. Testele care folosesc mai multe ținte genetice, precum cele utilizate în India, sunt mai puțin probabil să fie păcălite de mutații.
înălțimea genei simmons
Autoritățile de reglementare precum FDA din SUA monitorizează în mod obișnuit impactul mutațiilor asupra testelor RT-PCR În timp ce experți precum Dr. Rakesh Mishra, director al Centrului de Biologie Celulară și Moleculară din Hyderabad (CCMB), consideră că ICMR ar trebui să inițieze un exercițiu similar, este posibil să nu fie ușor de monitorizat în timp real peste 200 de truse RT-PCR aprobate în India împotriva mutațiilor emergente.
În primul rând, niciun producător nu a (sau nu va) face publice secvențele detaliate pe care le vizează testele. În timp ce trimit spre validare la ICMR, ei menționează doar genele țintă și nu secvența primerului, a spus un cercetător senior de la Ministerul Sănătății.
Până acum, totuși, există teren să te simți destul de încrezător chiar și în absența oricărei verificări a eficacității în timp real. Până în prezent, variantele de Covid-19 au în principal mutații ale genei S (proteina vârfului). Majoritatea truselor de aici utilizează regiuni conservate (neschimbate) ale țintelor, a spus Dr. Shanta Dutta, directorul Institutului Național de Holeră și Boli Enterice (NICED), Kolkata.
Scăderea prețului
Într-un an, prețul kit-ului RT-PCR a scăzut de la peste 1.100 Rs la sub 40 Rs. Deoarece scutirea de taxe de import a fost retrasă în octombrie 2020, majoritatea mărcilor străine au părăsit piața indiană din cauza costurilor suplimentare de 15%. Un număr de mărci indiene, de asemenea, au refuzat să vândă sub 100 Rs. Mulți au găsit clientelă corporativă dedicată, care nu se deranjează să plătească puțin în plus pentru a asigura calitatea. Unii oferă chiar mai multe kituri PCR la diferite niveluri de preț.
Deși nimeni nu spune acest lucru, mulți pun la îndoială calitatea concurenței mai ieftine. Contraviziunea este că fiecare kit de testare disponibil pe piață îndeplinește criteriile de validare ale ICMR și că orice război al prețurilor beneficiază în cele din urmă consumatorului.
Nu toată lumea este însă convinsă. Scăderea corespunzătoare a costului testului de laborator este de la 4500 Rs la 800 Rs. În plus, cineva care vizitează laboratorul ei local pentru un test Covid știe care kit este folosit? Câte laboratoare vor cheltui 100 Rs atunci când pot scăpa folosind un kit Rs-40? a spus unul dintre primii producători indieni de kituri Covid PCR.
ALĂTURĂ-TE ACUM :Canalul Telegram Explained Express
The Valoarea Ct
Un test RT-PCR amplifică acidul nucleic extras din probă pentru a-l detecta pe cel specific virusului Covid-19. Amplificarea are loc în cicluri cu o valoare de prag (Ct). În mod clar, cu cât prezența/încărcarea virală este mai mare, cu atât valoarea Ct sau numărul de cicluri de amplificare necesare pentru a o face detectabilă este mai mică.
ICMR a stabilit valoarea Ct la 35 pentru rezultate negative. Dincolo de aceasta, orice urmă de virus potențial prezentă este considerată neglijabilă, iar proba este considerată negativă Covid.
Dar anumite state precum Maharashtra au încercat să extindă limita de admisibilitate sugerând o valoare Ct de 24. Deoarece acest lucru ar exclude potențial un număr mare de persoane cu încărcătură virală cantitativ mai mică, dar semnificativă clinic, ICMR și-a reiterat poziția cu privire la o valoare Ct de 35. .
Cu toate acestea, există puțină claritate dacă toate statele urmează același criteriu de referință Ct. Potrivit directorilor superiori ai cel puțin două rețele de laboratoare cu mai multe state, aceștia au primit instrucțiuni verbale contradictorii și uneori nejustificate cu privire la astfel de parametri de testare. Nici măcar un test molecular nu este imun la prejudecăți subiective.
Imparte Cu Prietenii Tai:
